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1、 一.样本物种和属的来源：
2、 首先要考虑的是实验样本来自什么物种。
3、 1.哺乳动物组织或细胞样本通常包括-肌动蛋白、-微管蛋白、GAPDH、层粘连蛋白B、组蛋白H3、Na、Katpase等。
4、 2.对于植物来源的实验样本，可以选择plantactin、Rubisco等。
5、 3.对其他来源样本的研究较少，应参考文献报道，选择合适的蛋白质作为内参。
6、 二。目标蛋白质的分子量：
7、 选择内参抗体时，要考虑目标蛋白的分子量。通常，目标蛋白和内部参照蛋白之间的分子量差异应该大于5KD。比如目标蛋白的分子量是45KD，就不适合选择-肌动蛋白作为内参。GAPDH或-微管蛋白可以考虑作为内部参照。
8、 三。目标蛋白的表达位点：
9、 就一般蛋白质检测而言，-肌动蛋白、-微管蛋白抗体等。都足够了，而对于核蛋白的定量，尤其是当样品蛋白是核蛋白时，选择合适的核蛋白内参更能体现内参的价值。常用的细胞核内参抗体包括核纤层蛋白A、核纤层蛋白B和组蛋白H3。此外，其他常见的核蛋白内参包括PCNA、K70和K80。在一些文献报道中，Erk2、TATA结合蛋白(TBP)、c-Jun和c-Fos都被使用。对于膜蛋白检测，常用的内参抗体是Na，K ATP酶。对于线粒体蛋白的检测，VDAC1和COX IV常用为内参抗体。
